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crispr基因編輯技術(shù)的基本原理

來源:網(wǎng)絡(luò)

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日期:2025-07-06 18:29:48

  基本原理CRISPR簇是一個(gè)廣泛存在于細(xì)菌和古生菌基因組中的特殊DNA重復(fù)序列家族,其序列由一個(gè)前導(dǎo)區(qū)(Leader)、多個(gè)短而高度保守的重復(fù)序列區(qū)(Repeat)和多個(gè)間隔區(qū)(Spacer)組成。前導(dǎo)區(qū)一般位于CRISPR簇上游,是富含AT長度為300~500bp的區(qū)域,被認(rèn)為可能是CRISPR簇的啟動(dòng)子序列。重復(fù)序列區(qū)長度為21~48bp,含有回文序列,可形成發(fā)卡結(jié)構(gòu)。重復(fù)序列之間被長度為26~72bp的間隔區(qū)隔開。Spacer區(qū)域由俘獲的外源DNA組成,類似免疫記憶,當(dāng)含有同樣序列的外源DNA入侵時(shí),可被細(xì)菌機(jī)體識(shí)別,并進(jìn)行剪切使之表達(dá)沉默,達(dá)到保護(hù)自身安全的目的。工作原理當(dāng)細(xì)菌抵御噬菌體等外源DNA入侵時(shí),在前導(dǎo)區(qū)的調(diào)控下,CRISPR被轉(zhuǎn)錄為長得RNA前體(Pre RISPR RNA,pre-crRNA),然后加工成一系列短的含有保守重復(fù)序列和間隔區(qū)的成熟crRNA,最終識(shí)別并結(jié)合到與其互補(bǔ)的外源DNA序列上發(fā)揮剪切作......

  兩年前,一個(gè)縮寫為CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,規(guī)律間隔成簇短回文重復(fù)序列)的基因編輯工具橫空出世,席卷了許多實(shí)驗(yàn)室。而在這一系統(tǒng)被開發(fā)的數(shù)億年前,細(xì)菌和古細(xì)菌就利用其非常精確的對(duì)幾乎每個(gè)基因組中

  斯坦福大學(xué)遺傳學(xué)系,藥理學(xué)系的幾位學(xué)者合作,開發(fā)出了一種為原位蛋白質(zhì)工程重利用體細(xì)胞超突變的新技術(shù)――  CRISPR-X ,這將能幫助科學(xué)家們創(chuàng)建復(fù)雜的原始遺傳突變文庫,分析完善蛋白質(zhì)工程。這一研究成果在線日的Nature Methods雜志上,文章的通訊作者是斯坦福大學(xué)Micha

  兩年前,一個(gè)縮寫為CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,規(guī)律間隔成簇短回文重復(fù)序列)的基因編輯工具橫空出世,席卷了許多實(shí)驗(yàn)室。而在這一系統(tǒng)被開發(fā)的數(shù)億年前,細(xì)菌和古細(xì)菌就利用其非常精確的對(duì)幾乎每個(gè)基因組中

  CRISPR技術(shù)的確在科學(xué)界掀起了基因組編輯的狂潮。在Pubmed中快速檢索“CRISPR”,目前已有1400多項(xiàng)結(jié)果。也相繼有專家為該技術(shù)撰寫了綜述論文,例如:Science綜述:CRISPR-Cas9系統(tǒng)的歷史和未來;北大魏文勝最新發(fā)表CRISPR綜述。最近,來自美國加州大學(xué)伯克利分校和

  一位多年來埋頭于實(shí)驗(yàn)室枯燥生活的微生物學(xué)家,突然有一天由于基因編輯技術(shù)站在了聚光燈下 現(xiàn)年48歲的Emmanuelle Charpentier在過去二十年學(xué)術(shù)生涯中輾轉(zhuǎn)去過了5個(gè)國家九所不同的研究院,“我總是不得不從零開始,親自構(gòu)建新的實(shí)驗(yàn)室,”她說。45歲之前Charpentier還無法雇

  張鋒實(shí)驗(yàn)室的一位研究生:Winston Yan的項(xiàng)目就是利用CRISPR-Cas9基因組編輯系統(tǒng)的一個(gè)突變來敲除調(diào)控小鼠膽固醇的基因?!白罱K的目的是為治療應(yīng)用鋪平道路,”Yan說,他最近完成了他的研究生工作,同時(shí)也第一次遇到CRISPR脫靶效應(yīng)的問題。CRISPR能幫助研究人員快速有效地對(duì)基

  斯坦福大學(xué)遺傳學(xué)系,藥理學(xué)系的幾位學(xué)者合作,開發(fā)出了一種為原位蛋白質(zhì)工程重利用體細(xì)胞超突變的新技術(shù)—— CRISPR-X ,這將能幫助科學(xué)家們創(chuàng)建復(fù)雜的原始遺傳突變文庫,分析完善蛋白質(zhì)工程。這一研究成果在線日的Nature Methods雜志上,文章的通訊作者是斯坦福大學(xué)Mi

  想象一下細(xì)菌和病毒一直處于軍備競賽之中。對(duì)很多細(xì)菌而言,一種抵抗病毒感染的防御線是一種復(fù)雜的RNA引導(dǎo)的“免疫系統(tǒng)”,即CRISPR-Cas。這個(gè)免疫系統(tǒng)的核心是一種識(shí)別病毒DNA和觸發(fā)它破壞的監(jiān)視復(fù)合物。然而,病毒能夠反擊,利用抗CRISPR蛋白讓這種監(jiān)視復(fù)合物不能夠發(fā)揮功能。但是,在此之前,

  能夠方便而精確的對(duì)DNA和核苷酸序列進(jìn)行編輯,是科研工作者們長期以來的夢(mèng)想。CRISPR/Cas9系統(tǒng)的誕生和成熟標(biāo)志這這一夢(mèng)想逐漸變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)。CRISPR/Cas9系統(tǒng),作為第三代基因編輯技術(shù),它的本質(zhì)其實(shí)是細(xì)菌中一種對(duì)付諸如病毒等外來DNA的防御系統(tǒng)。此系統(tǒng)的工作原理是 成簇的、規(guī)律間隔的短回

  在4月20日《自然》(Nature)雜志上的一篇新研究論文中,科學(xué)家們描繪了一種新型細(xì)菌CRISPR-Cpf1系統(tǒng)的分子細(xì)節(jié),這為實(shí)現(xiàn)其他的基因編輯應(yīng)用,如平行靶向多個(gè)基因打開了可能的途徑。領(lǐng)導(dǎo)這一研究的任職于德國馬克思普朗克感染生物學(xué)研究所和瑞典于默奧大學(xué)的Emmanuelle Charp

  英國??巳卮髮W(xué)的研究人員發(fā)現(xiàn),一種被稱為噬菌體的病毒在面對(duì)迎面而來的攻擊時(shí),首先削弱細(xì)菌的防御力,然后再殺死細(xì)菌。這一發(fā)現(xiàn)是一個(gè)關(guān)鍵性突破,它將有助于改善噬菌體療法,治療危機(jī)生命的細(xì)菌感染。細(xì)菌有防御系統(tǒng),例如眾所周知的CRISPR-Cas,以保護(hù)自身免受病毒侵襲。像軍備競賽一樣,噬菌

  美國國立衛(wèi)生研究院眼科研究所的一組研究人員報(bào)道了最新成果:他們通過一種病毒載體直接向眼睛輸送了基于CRISPR-as9的治療元件,成功在視網(wǎng)膜變性小鼠中阻止了視網(wǎng)膜色素變性。這一研究成果公布在3月14日的Nature Communications雜志上,文章的通訊作者是美國國立衛(wèi)生研究院眼科研究

  安捷倫通過基于 CRISPR 的產(chǎn)品擴(kuò)展了 SureGuide 產(chǎn)品系列,從而加速疾病研究基于 CRISPR 的全新轉(zhuǎn)錄激活和干擾 (a/i) 文庫2017年10月20日,北京——安捷倫科技公司(紐約證交所: A)今日宣布首次將 SureGuide 混合 CRISPR 文庫擴(kuò)展到功能基因

  在探索CRISPR基因編輯系統(tǒng)的過程中,研究人員從溫泉、泥炭沼澤、糞便甚至酸奶中搜尋各種微生物?,F(xiàn)在,由于生成式人工智能的進(jìn)步,他們可能只需按一下按鈕就能設(shè)計(jì)出這些系統(tǒng)。據(jù)《自然》報(bào)道,日前,研究人員公布了他們使用一種名為蛋白質(zhì)語言模型的生成式人工智能工具,設(shè)計(jì)CRISPR基因編輯蛋白質(zhì)的細(xì)

  美國ZL局審查與上訴委員會(huì)近日就CRISPRZL糾紛作出裁決,麻省理工學(xué)院和哈佛大學(xué)共同創(chuàng)建的布羅德研究所可繼續(xù)保有此前獲批的“基因剪刀”技術(shù)ZL。這意味著這場價(jià)值數(shù)十億美元的ZL案糾紛以張鋒一方獲勝暫告一段落。CRISPR技術(shù)先驅(qū)(從左到右):George Church、Jennifer Do

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  2020年4月17日早晨,“STAT”網(wǎng)站發(fā)布了一篇新聞報(bào)道,該報(bào)道指出科學(xué)家正在測試將CRISPR技術(shù)應(yīng)用于新冠肺炎的快速檢測。作為近幾年大熱的一個(gè)全新的基因編輯技術(shù),CRISPR與中國也頗有淵源。擁有“CRISPR之父”之稱的著名科學(xué)家張鋒是出生于中國河北石家莊的華裔科學(xué)家,更是當(dāng)今最受關(guān)注的華

  ZFNZFN,即鋅指核糖核酸酶,由一個(gè) DNA 識(shí)別域和一個(gè)非特異性核酸內(nèi)切酶構(gòu)成。DNA 識(shí)別域是由一系列 Cys2-His2鋅指蛋白(zinc-fingers)串聯(lián)組成(一般 3~4 個(gè)),每個(gè)鋅指蛋白識(shí)別并結(jié)合一個(gè)特異的三聯(lián)體堿基。鋅指蛋白源自轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子家族(transcription fa

  前言時(shí)至今日,很多研究者仍著迷于研究細(xì)菌CRISPR系統(tǒng)的功能,以及如何借助對(duì)相關(guān)機(jī)制的理解來產(chǎn)生新的技術(shù)。CRISPR系統(tǒng)目前在臨床診斷與基因療法中的研究成果也在不斷涌出。近日,Sherlock Biosciences公司宣布其基于CRISPR技術(shù)的新冠病毒試劑盒已獲得美國FDA的緊急使用

  ZFNZFN,即鋅指核糖核酸酶,由一個(gè) DNA 識(shí)別域和一個(gè)非特異性核酸內(nèi)切酶構(gòu)成。DNA 識(shí)別域是由一系列 Cys2-His2鋅指蛋白(zinc-fingers)串聯(lián)組成(一般 3~4 個(gè)),每個(gè)鋅指蛋白識(shí)別并結(jié)合一個(gè)特異的三聯(lián)體堿基。鋅指蛋白源自轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子家族(transcription fa

  ZFNZFN,即鋅指核糖核酸酶,由一個(gè) DNA 識(shí)別域和一個(gè)非特異性核酸內(nèi)切酶構(gòu)成。DNA 識(shí)別域是由一系列 Cys2-His2鋅指蛋白(zinc-fingers)串聯(lián)組成(一般 3~4 個(gè)),每個(gè)鋅指蛋白識(shí)別并結(jié)合一個(gè)特異的三聯(lián)體堿基。鋅指蛋白源自轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子家族(transcription fa

  患者將參加首項(xiàng)研究,測試一種名為CRISPR的基因編輯技術(shù)在體內(nèi)的效果,該研究旨在治愈遺傳性失明?;加羞@種疾病的人擁有正常的眼睛,但缺少一種可以將光線轉(zhuǎn)換成信號(hào)、傳遞給大腦、使其能夠看見東西的基因。這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)治療的目的是為孩子和成人提供他們?nèi)狈Φ慕】蛋姹镜幕?,使用一種工具來切割或編輯特定

  如今,你幾乎在一每本科學(xué)或醫(yī)學(xué)雜志上,都能讀到,關(guān)于CRISPR 的信息。7 年前,自從改變游戲規(guī)則的 CRISPR-Cas9 方法首次用于基因組編輯以來,各行各業(yè)都在探索其無限的可能性。世界各地的生化學(xué)家正在夜以繼日地工作,檢驗(yàn)這種創(chuàng)新做法的界限與局限。然而,方法不斷創(chuàng)新,不斷發(fā)展,從大型制藥企業(yè)

  每當(dāng)有新的CIRSPR-Cas9相關(guān)文章發(fā)表時(shí),Addgene公司的工作人員就會(huì)迫不及待地研讀。Addgene是家非盈利公司,研究者們把自己使用的分子工具存放在這里,以供其他科學(xué)家們盡快使用這一技術(shù)。Addgene公司執(zhí)行董事Joanne Kamens 指出,一篇大熱的論文一發(fā)表,幾分鐘內(nèi)他們就

  近日,科學(xué)家在美國華盛頓聚集,參加一場專注于基因治療的年度會(huì)議。基因治療是一個(gè)長期處于掙扎中的領(lǐng)域,最近因在小型臨床試驗(yàn)中取得的一系列頗有前景的成果而重新贏得尊敬。如今,很多人相信,一種名為CRISPR的強(qiáng)大的新基因編輯技術(shù),將加入到勢(shì)頭越來越猛的基因治療大軍中。不過,CRISPR線

  CRISPR-Cas9是細(xì)菌在漫長的進(jìn)化史中演化出的重要防御機(jī)制。這個(gè)監(jiān)控體系能夠根據(jù)引導(dǎo)RNA的指示,靶標(biāo)并降解入侵者的遺傳物質(zhì)。現(xiàn)在,CRISPR-Cas9已經(jīng)成為了炙手可熱的基因組編輯工具。多倫多病童醫(yī)院的科學(xué)家們對(duì)CRISPR-Cas9進(jìn)行改造,并將其用于基因表達(dá)調(diào)控。他們成功在杜氏

  中東呼吸綜合征冠狀病毒( Middle East respiratory syndrome coronavirus ,MERS-CoV)是近年來出現(xiàn)的一種新型高致病性冠狀病毒,于2012年在中東首次被鑒定出來,隨后又在幾個(gè)歐洲國家發(fā)現(xiàn)了它的蹤跡。這種疾病會(huì)引發(fā)人類重癥肺疾病,臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、咳嗽、急

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