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Nature子刊:陳斯迪葉露鵬團(tuán)隊利用體內(nèi)AAV-睡美人CRISPR篩選技術(shù)發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞癌癥免疫治療新靶點

來源:網(wǎng)絡(luò)

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日期:2025-03-20 04:53:46

 ?。∟K)細(xì)胞在腫瘤免疫治療中展現(xiàn)出巨大潛力,并引起了廣泛關(guān)注。kaiyun官方開云首個用于治療液體瘤的CAR-NK臨床試驗成功驗證了CAR-NK免疫療法的有效性和安全性。然而,CAR-NK在治療實體瘤方面仍面臨許多挑戰(zhàn)。腫瘤免疫和細(xì)胞治療領(lǐng)域一直在努力尋找能夠增強(qiáng)NK細(xì)胞抗腫瘤能力,尤其是對抗實體瘤的靶點,以改進(jìn)NK細(xì)胞工程和CAR-NK細(xì)胞療法。高通量篩選是一種識別免疫細(xì)胞靶點的有效方法,但由于NK細(xì)胞擴(kuò)增能力有限、轉(zhuǎn)染效率低以及難以進(jìn)行基因編輯等特性,目前尚未有在NK細(xì)胞中實現(xiàn)CRISPR篩選的研究報道。

  研究團(tuán)隊歷經(jīng)多年的技術(shù)攻關(guān),利用AAV-轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)將CRISPR文庫整合到基因組中,克服了原代NK細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)和基因編輯效率低的障礙。研究通過四個平行的CRISPR篩選實驗以及單細(xì)胞測序數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)了一個全新靶點——CALHM2,為NK細(xì)胞腫瘤免疫提供了新的治療靶點。kaiyun官方開云

Nature子刊:陳斯迪葉露鵬團(tuán)隊利用體內(nèi)AAV-睡美人CRISPR篩選技術(shù)發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞癌癥免疫治療新靶點(圖1)

  在這項研究中,研究團(tuán)隊利用AAV-轉(zhuǎn)座子技術(shù)高效整合CRISPR文庫到原代NK細(xì)胞基因組中,并在四種不同的腫瘤模型中進(jìn)行體內(nèi)高通量基因篩選。同時,團(tuán)隊利用單細(xì)胞RNA測序(scRNA-seq)描繪腫瘤浸潤NK細(xì)胞亞群和轉(zhuǎn)錄組圖譜。

Nature子刊:陳斯迪葉露鵬團(tuán)隊利用體內(nèi)AAV-睡美人CRISPR篩選技術(shù)發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞癌癥免疫治療新靶點(圖2)

  值得注意的是,兩組實驗發(fā)現(xiàn)了一個唯一共同的NK新靶點——CALHM2,敲除CALHM2的NK細(xì)胞具有更強(qiáng)的殺傷性和腫瘤浸潤能力,CALHM2的mRNA能夠逆轉(zhuǎn)CALHM2敲除的NK細(xì)胞的表型。在人原代NK細(xì)胞中,CALHM2敲除增強(qiáng)了它們的細(xì)胞毒性、脫顆粒和細(xì)胞因子的產(chǎn)生。在對CAR-NK細(xì)胞具有抵抗力的實體瘤模型中,CALHM2敲除的CAR-NK細(xì)胞在體內(nèi)顯示出強(qiáng)大的抗腫瘤效果。

Nature子刊:陳斯迪葉露鵬團(tuán)隊利用體內(nèi)AAV-睡美人CRISPR篩選技術(shù)發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞癌癥免疫治療新靶點(圖3)

  總的來說,該研究發(fā)現(xiàn)了一個NK細(xì)胞的全新檢查點——CALHM2,并展示了通過敲除CALHM2來構(gòu)建增強(qiáng)型NK細(xì)胞療法的潛力 。

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